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采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,利用抗体(一抗)与抗原(待测蛋白)发生特异性结合的原理,以抗体作为探针钓取目的蛋白,经电泳分离后的蛋白往往需再利用电泳方法将蛋白质转移到固相载体上,把这个过程称为电泳印迹。
值得注意的是在加入一抗前应首先加入非特异性蛋白,如牛血清白蛋白(BSA)或脱脂奶粉对膜进行“封闭”而防止抗体与膜的非特异性结合,最终来考察蛋白表达情况。
Western blot(蛋白印迹)作为科研研究中最为平常的实验,却蕴含了很多知识,可谓是小实验里却有大文章。
尽管绝大多数研究僧在接触该实验时都会的体无完肤,蛋白印迹实验(Western Blot),作为医药学专业学生必备科研生存技巧,尽管步骤及操作并不是很复杂,但各路大神却常常拜倒它的魔爪之下,堪称科研路上的第一大玄学!却也在和WB斗志斗勇的过程中积累了不少经验。
正所谓前人种树,后人乘凉,现在小编就把各位前辈做WB的各种经验总结起来,希望对大家的科研之路起到帮助!
注:篇幅有限,以上仅部分展示,有需要的小伙伴想要获取【Western blot技术大全】更多详细内容,欢迎私信回复“技术大全0615”领取。返回搜狐,查看更多
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