具体来说，荧光是一种光致发光，光使电子处于激发态。激发态通过振动向环境迅速损失热能，然后从最低的单线态激发态发射出光子。这个光子发射过程与其他非辐射过程竞争，包括能量传递和热损失。

　　荧光测量是一种分析技术，利用物质在受到激发后发射出的荧光辐射的强度、衰减速率、寿命等特征，对物质进行分析和研究。荧光物质在特定波长的辐射能量辐射下，部分电子跃迁到高能级态，能发射出具有一定光谱分布的辐射，且一般都是在各个方向上辐射能量的散射光，并在短时间内通过非辐射跃迁或受激发射的方式，退回到低能级态，释放出能量，并以荧光的形式辐射出来，产生荧光信号。

　　荧光光谱测量产生的荧光能量比激发光的光子能量小，只相当于激发光能量的3%左右，其灵敏度高、选择性强、样品用量少、方法简便、具备环保性，可以反映物质的分子结构、电子能级结构等信息，荧光测量。荧光测量技术也因其高灵敏度、无创或微创等特点，适用于分析物质的结构、组成、含量、活性等方面，在材料（溶液、粉末、薄膜）科学、环境分析、生物分析、分子基因、细胞生物、医疗诊断和药物筛选等多个领域中有着广泛的应用。

　　荧光染料吸收激发光的效率称为分子消光系数。分子消光系数越大，给定波长范围内光吸收的可能性就越大（诱发荧光发射的前提条件之一）。发射光的产率称为量子产率，即发射的量子数与吸收的量子数之比（许多商用荧光染料的产率在0.1和0.9之间）。量子产率低于1是能量通过非辐射路径（如热或者光化学反应），而不是通过荧光的再辐射路径损失能量的结果。下表中给出了一组特定荧光染料的荧光量子产率。请注意，有些荧光染料的量子产率似乎很低（苯），而其他则很高（荧光素和罗丹明-B）。

　　光源的分子消光系数、量子产率和平均发光强度（固有亮度）以及荧光寿命（激发态的持续时间）都是影响荧光发射强度和可用性的重要因素。此外，荧光染料周围的局部环境是决定荧光发射特性的关键因素。环境中的溶剂粘度、离子浓度、pH值和疏水性等变量，对荧光强度和激发态的寿命都有着重要影响。

　　荧光测量的原理是基于分子的能级结构和分子的荧光现象。利用物质在受到光激发后，部分电子从基态跃迁到激发态，然后在短时间内通过非辐射跃迁或受激发射的方式，退回到基态。在这个过程中，物质释放出能量，并以荧光的形式辐射出来，产生荧光信号。荧光信号的特征包括荧光强度、荧光寿命、荧光发射光谱等。荧光强度是荧光信号的强度，与激发光强度成正比；荧光寿命是荧光信号的寿命，与物质的性质有关；荧光发射光谱是荧光信号的波长分布，可以反映物质的组成和结构。荧光测量可以通过测量荧光信号的强度、寿命、发射光谱等特征，来对物质进行分析和研究。

　　在荧光测量中，使用光谱仪对样品进行测量。荧光光谱仪可以通过调整激发波长和检测波长，以及对仪器进行校准，来获取样品的荧光光谱数据。

　　能级图描述了普通有机分子的电子能级，并标示了能级间的电子跃迁。S0、S1和T1分别代表基态，低单态和低三重态。光激发后，激发态分子可以沿几种跃迁路径，包括辐射过程和非辐射过程而回到基态。辐射过程涉及了光发射，例如荧光和磷光。非辐射过程涉及内转换和系统间热释放。辐射过程和非辐射过程相互竞争。

　　所谓光致发光（Photoluminescence简称PL），是指物体依赖外界光源进行照射，从而获得能量，产生激发导致发光的现象。也指物质吸收光子（或电磁波）后重新辐射出光子（或电磁波）的过程。光致发光过程包括荧光发光和磷光发光。

　　从量子力学理论上，这一过程可以描述为物质吸收光子跃迁到较高能级的激发态后返回低能态，同时放出光子的过程。光致荧光发光是多种形式的荧光（Fluorescence）中的一种。原理图如下图：

　　而在现阶段光致发光材料的研究中，对荧光量子效率的计算非常重要，因为这是反映光致发光材料发光能力的重要特征指标。

　　荧光量子效率又称荧光量子产额（quantum yield of fluorescence）或荧光效率。一般情况下，荧光量子效率、荧光量子产额与荧光效率描述等价。首先让激发光照射到空白容器，获得激发光谱，得总光子数。然后，在容器中放入样品，再用激发光照射获得未吸收光子数和发射光子数。通过单位时间（秒）内，发射光子（绿色区域）和吸收光子数（蓝色区域）的比值，计算出绝对荧光量子产率（PLQY）。可以使用下列公式表达：

　　1、相对量子产率测量：需要一种已知量子产率的标准品作为参照，通过对标准物和样品进行吸光度和荧光的测量换算得到样品的量子产率。只适用于液体样品。

　　2、绝对量子产率测量：不需要标准样品进行对比，广泛适用于液体、薄膜和粉末样品。在进行测量时需要积分球附件；积分球内表面涂层一般是高反射性材料，比如硫酸钡和聚四氟乙烯。样品表面各个方向的激发光或者是发射光进行积分球均匀化后从出射口出来，并进入到单色器中最后被检测器检测到。

　　电致发光（Electroluminescent，简称EL），是通过加在两电极的电压产生电场，被电场激发的电子碰击发光中心，而引致电子在能级间的跃迁、变化、复合导致发光的一种物理现象。由于电致发光产品具有发光效率高、器件寿命长、响应速度快、视角特性好、色彩度强、成本价格低、可弯曲等特点，在显示器和照明领域有非常广阔的应用前景。

　　决定电致发光产品性能是否优良的，就是电致发光器件了。我们常说到的OLED、QLED都属于这类器件。它们主要包括五层结构：阴极、电子传递层、发光层、空穴传递层和阳极。其中发光层的材料称为电致发光材料，OLED器件的发光层为有机分子材料，QLED器件的发光层为量子点材料。

　　电致发光器件的EQE（外量子效率）值是决定器件封装以后光效的重要参数之一，也是真正决定电致发光器件是否能够商业化的重要参数之一。无论对于显示器还是照明，从电能转化为光能的发光效率都非常重要，其主要反映了输入功率的利用率。发光效率越高，器件的热损耗越小，能量利用率越高。在电致发光器件的研究中，对应的参数则为外量子效率（EQE，External Quantum Efficiency）。

　　现在普遍的EQE测量方法有两种，第一种是通过亮度计测量法线方向的亮度，通过标准朗伯体分布理论计算得到器件的EQE值。该方法有严重的缺点：实际中器件的朗伯体分布并非标准的余弦分布，会有部分分布不均的现象，此时通过理论计算的结果会非常不准确。

　　第二种EQE的测量方法是通过积分球配件，将器件的整体光通量收集，并通过计算得到器件的EQE。该方法又有两种测量方案，一种是将器件置于积分球球壁上，仅测量器件的前向通量，称为2π法；一种是将器件置于积分球内部，测量器件的整体通量，称为4π法。

　　荧光激发光谱：荧光激发光谱是让不同波长的激发光源激发荧光物质使之发生荧光，而让荧光以固定的发射波长照射到检测器上，然后以激发光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标，所绘制的图表示荧光物质在不同波长激发光源的激发下测得的某一波长处的荧光强度的变化情况，也就是不同波长的激发光的相对效率，即为荧光激发光谱。荧光发射光谱的形状与激发光的波长无关 。

　　荧光发射光谱：荧光发射光谱则是使激发光的波长和强度保持不变，而让荧光物质所发出的荧光通过发射单色器照射于检测器上，亦即进行扫描，以荧光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标作图，光谱曲线表示为某一固定波长的激发光源激发作用下荧光强度在不同波长处的分布情况，也就是荧光中不同波长的光成分的相对强度，即为荧光光谱，又称荧光发射光谱。

　　发射光谱是固定激发波的波长，测定发射光强度与波长（有时候也测波数或者频率等）的关系，通俗而不太严谨地说，发射光谱测定的是发射光的颜色。激发光谱是固定发射光的波长，测量激发光的波长与荧光强度之间的关系。如从发射光谱知道某分子最大发射波长是500nm，我们希望知道用哪个波长的激发光照射这个分子，可以获得最大的发射强度，就可以通过测定激发光谱来实现。一般情况下，最大激发波长小于最大发射波长。实际应用中，根据我个人经验，发射光谱用的比激发光谱要多。

　　荧光光谱测量首先需要明确测量样品的类型和要求。其次，需要确定荧光光谱测量的条件和参数，如激发波长、检测波长、积分时间等。最后，需要制定荧光光谱测量的标准操作流程和数据分析方法：

　　样品类型和要求：需要明确样品的物理化学性质、浓度、形态等，以及测量的目的和要求，如定量分析、质量分析、结构分析等。

　　荧光光谱测量条件和参数：需要选择合适的荧光光谱仪，确定激发波长、检测波长、积分时间、激发光强度等参数。目前大多数荧光测量是相对测量，测量过程受设备激发光源、荧光自身的非均匀性光漂白和检测设备的检测限等因素的影响，导致测量数据不准确，限制了仪器之间、实验室之间测量结果的可比性。仪器测量数据的准确性受以下6个因素影响，分别为：（1）光照尺寸大小；（2）照射到样品的激发光强度；（3）光照射到样品的均匀性；（4）仪器自身的分辨力；（5）检测器光谱响应；（6）光谱分辨力。

　　在荧光痕量检测中，光源的稳定性是影响荧光测量的重要因素，关系着整个检测系统的稳定及精度。将校准玻片放置在荧光显微镜下，测量荧光校准玻片的荧光强度，如果荧光强度发生了偏差，可以根据偏差及时校准荧光显微镜，不仅可以实现对荧光显微镜稳定性校准； 同时还可以评估不同荧光仪器性能，实现不同仪器测量数据的可比性，提高荧光显微镜测量的准确性。

　　对于复杂样品，可能需要进行预处理，如分离、纯化、稀释等。荧光物质筛选及其光谱特性合适的荧光染料主要有 3 个标准：（1）荧光物质的激发波长和发射波长与所校准荧光检测设备通道相匹配；（2）所选荧光物质的激发光谱与发射光谱具有较大的斯托克斯位移；（3）荧光物质具有良好的稳定性，即较小的光漂白。常用的荧光校准材料主要是有机荧光染料，如Cy3、Cy5、罗丹明等，由于有机染料在相对较短的时间内即可被光漂白，光稳定性较差。量子点具有很好的光稳定性，具有较大的斯托克斯位移，同时具有宽激发谱和窄发射谱，基于这些良好性能，我们选择了量子点作为候选荧光染料。

　　标准操作流程和数据分析方法：需要制定荧光光谱测量的标准操作流程，包括样品制备、仪器操作、数据采集、数据处理等步骤。同时，需要选择合适的数据处理方法，如基线校正、峰形分析、曲线拟合等，以及质量控制方法，如标准曲线法、内标法等。

　　在开发新的发光材料过程中，提高它们的光致发光效率是至关重要的，提高发光材料的量子效率就需要精确量子效率测量技术，iSpecRad-PQY光致发光量子效率测量系统操作便捷，是莱森光学（LiSen Optics）专门针对器件的光致发光特性进行有效测量，可在手套箱内完成搭建，无需将样品取出即可完成光致发光量子效率的测试。

　　系统搭配包括光谱仪，带辐射校准光源积分球，激光光源、光纤及配套治具等，莱森光学光道仪信噪比高，杂散光低，动态范用大适合不同波段和强度的激发光和发射光测量，同时，该系统配有强大的专用测试软件，操作逻辑简单，测试过程快捷方便。莱森光学iSpecRad-PQY光致发光量子效率系统可以支持粉末、薄膜和液体样品的测量，适用于有机金属复合物、荧光探针、绕料敏化型PV材料，OLED材料、LED荧光粉等领域。

　　iSpecRad-EQE电致发光量子效率测量系统是莱森光学（LiSen Optics）综合发光特性测量平台中的重要成员，可专门针对发光器件的光电特性进行有效测量。系统搭配包括光谱仪、带辐射校准光源积分球、电流源表、探针台、光纤及治具等。光谱仪具有信噪比高、杂散光低，动态范围大等特性，适合不同波段和强度的激发光和发射光测量，可确保测量结果的准确性。同。